一般細(xì)胞因子的檢測，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測，由于因子分子量比力大，一般10幾個(gè)KD左右，很容易找到兩個(gè)或多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不通的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗，每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子，然后加樣品，再加不帶標(biāo)志的檢測抗體，顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高，吸光度越低。病原體抗原的定性與定量，評估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。
   
    兔ELISA試劑盒中封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。蛋白和非離子型去污劑。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加背景噪音，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。兔ELISA試劑盒如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋，兔ELISA試劑盒其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物，其中的蛋白質(zhì)也會(huì)部分地吸附于固相載體表面，zui后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。