技術(shù)文章
Technical articles產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲(chǔ)存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位;2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性,中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一,在氧化時(shí)釋放出能量,中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等,傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料,最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色,油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀,與磷脂結(jié)合力稍差,其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色,染料在細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。
油紅O染色液(細(xì)胞涂片專用)簡(jiǎn)稱ORO染色液,可顯示最小的脂滴,可優(yōu)先為脂類從溶劑中吸附染料,可用于細(xì)胞涂片、骨髓涂片、體液涂片、血液涂片等的油紅O染色,標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液,如需要固定可采用10%福爾馬林,脂肪陽(yáng)性染色結(jié)果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱 |
規(guī)格 4×20ml |
Storage | |
試劑(A): ORO Fixative | 20ml | RT | |
試 劑 (B): ORO Stain | B1: ORO Stain A | 12ml | RT |
B2: ORO Stain B | 8ml | 4℃ | |
按 B1:B2=3:2 比例混合, 即為 ORO Stain,可靜置 20~40min 或3000rpm 離心 10 分鐘取上清備用。 | |||
試劑(C): Mayer 蘇木素染色液 | 20ml | 4℃ | |
試劑(D): ORO Buffer | 20ml | RT | |
使用說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
自備材料:
1、60%異丙醇、蒸餾水
2、顯微鏡、載玻片
操作步驟(僅供參考):
1、 制備新鮮骨髓、血液、細(xì)胞涂片,入ORO Fixative固定10~15min。
2、 取出涂片,放于流通的空氣中10~15min。
3、 入新配制好的ORO Stain浸染10~15min。
4、 入60%異丙醇漂洗20~30s,流水沖洗,入蒸餾水稍微清洗。
5、5、 入Mayer蘇木素染色液復(fù)染核2~5min。
6、6、 (可選)入 ORO Buffer 1min。
7、7、 蒸餾水漂洗8~10min。
8、8、 晾干,鏡檢。
染色結(jié)果
中性脂肪 | 橙紅色或橘紅色 |
磷脂 | 粉紅色 |
細(xì)胞核 | 藍(lán)色 |
注意事項(xiàng):
1、ORO染色工作液不穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,影響染色觀察,可按需配制后采用靜置
20~40min或3000rpm 離心10分鐘,取上清備用。
2、Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。
3、染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個(gè)月有效;常溫運(yùn)輸,4℃保存。