白介素Elisa試劑盒以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。
白介素Elisa試劑盒如何標本、收集和貯運呢?
1、嚴峻溶血:以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構成假陽性;
2、混有紅細胞的血清易沉積或附著在聚Z烯孔內(nèi)不易洗凈;
3、標本凝結不全,有時為了爭取時刻快速檢測,常在血液還未開端凝結時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構成假陽性成果;
4、采血試管洗刷不*、重復運用易穿插污染;
5、塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構成假陰性;
6、血清標本宜在新鮮時檢測,嚴峻溶血標本禁用。一般說來, 在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4°C,標本在冰箱中保存時刻過長導致血清lgG聚合,使間接法的試劑本底加深。超過-周測定的需20°C保存。凍住血清融解后,白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應充沛混勻并避免發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。重復凍融會使抗體效價下跌,所以測抗體的血清標本如需保存作屢次檢測,宜少數(shù)分裝冰存。