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體液氧化應(yīng)激活性氧魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2021-04-02點(diǎn)擊次數(shù):1427

主要用途

      體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)自由基探針魯米諾和強(qiáng)化劑的參與下,體液樣品中的活性氧族使發(fā)光物氧化降解并發(fā)光,在化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)的幫助下定量檢測(cè)樣品中活性氧族(過(guò)氧化氫)的生成和數(shù)量經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液、羊水等各種體液活性氧族的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液(Reagent A      毫升

強(qiáng)化液(Reagent B      毫升

發(fā)光液(Reagent C      毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1

保存方式

保存強(qiáng)化液(Reagent B)和發(fā)光液(Reagent C在-20冰箱里,嚴(yán)格避免光照;其余的保存在4冰箱里,有效保證6

用戶自備

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

臺(tái)式離心機(jī):用于去除樣品雜質(zhì)

測(cè)試管:用于發(fā)光檢測(cè)用的試管

化學(xué)發(fā)光儀:用于檢測(cè)化學(xué)發(fā)光

實(shí)驗(yàn)步驟

  • 樣品預(yù)處理
  • 準(zhǔn)備好1.5毫升離心管
  • 移取1毫升液體到離心管 
  • 放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為700g3000RPM,例如eppendorf 5415
  • 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
  • (選擇步驟)放進(jìn)-70℃冰箱里保存
  • 放進(jìn)37培養(yǎng)箱里備用(1小時(shí)內(nèi))
  • 測(cè)讀

    測(cè)讀開(kāi)始前,打開(kāi)化學(xué)發(fā)光儀,設(shè)定儀器內(nèi)溫度為37預(yù)熱和整合測(cè)讀10秒或 15分鐘;然后關(guān)掉實(shí)驗(yàn)室的燈光。將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化,嚴(yán)格置于暗室里。然后進(jìn)行下列操作。

  • 準(zhǔn)備好測(cè)試管,做好標(biāo)記:陰性對(duì)照、樣品本底和樣品活性
  • 移取xx微升清理液(Reagent A陰性對(duì)照測(cè)試管
  • 移取400微升上述預(yù)處理的待測(cè)體到樣品本底測(cè)試管
  • 移取400微升上述預(yù)處理的待測(cè)體液到樣品活性測(cè)試管
  • 分別加入xx微升強(qiáng)化液(Reagent B到上述測(cè)試管,除樣品本底測(cè)試管外
  • 分別加入xx微升發(fā)光液(Reagent C上述測(cè)試管,除樣品本底測(cè)試管外
  • 輕輕渦旋混勻
  • 即刻放進(jìn)37℃化學(xué)發(fā)光儀里測(cè)讀
  • 整合測(cè)讀10秒,獲得相對(duì)發(fā)光單位(relative light unit;RLU
  • 或者整合測(cè)讀15分鐘,獲得光電子讀數(shù):
  • 計(jì)算ROS水平:

 注意事項(xiàng)

  • 本產(chǎn)品為50次操作
  • 如果測(cè)定體系變化,則試劑用量相應(yīng)變化
  • 操作時(shí),須戴手套
  • 測(cè)試前,液須新鮮收集,1小時(shí)內(nèi)比較佳
  • 樣品制備后即刻測(cè)讀,不宜過(guò)夜保存
  • 必要時(shí),例如活性氧族過(guò)低,可以濃縮樣品處理
  • 測(cè)讀的所有步驟均須在暗室里進(jìn)行
  • 如果是注射式化學(xué)發(fā)光儀,建議測(cè)試前后使用無(wú)離子水沖洗化學(xué)發(fā)光儀注射(injector)管道
  • 本公司提供系列活性氧分析試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感