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原卟啉(FEP)檢測(cè)試劑盒(熒光比色法)

更新時(shí)間:2020-08-14點(diǎn)擊次數(shù):1209

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量為 562.66,CAS 號(hào)為 553-12-8,在生物體內(nèi)原卟啉的含量可間接反應(yīng)鐵的缺乏與否。原卟啉(FEP)檢測(cè)試劑盒(熒光比色法)是利用酸化液破壞紅細(xì)胞并提取原卟啉(FEP),后者在紫外線(xiàn)照射下會(huì)發(fā)出熒光,可通過(guò)熒光分光光度計(jì)等測(cè)定 FEP 含量,該試劑盒主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)的測(cè)定,反映缺鐵性貧血的程度,但應(yīng)事先或者事后檢測(cè)相應(yīng)的紅細(xì)胞比容。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成:

試劑(A): 肝素鈉溶液(125U/ml) 0.5ml -20℃

試劑(B): 原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L) 1ml  -20℃ 避光

試劑(C): FEP 酸化液               2×100ml  RT

使用說(shuō)明書(shū)                       1 

自備材料:

1、 生理鹽水

2、漩渦振蕩器、離心機(jī)

3、熒光分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考)

1、配制肝素抗凝全血:按新鮮全血:肝素鈉溶液(125U/ml)=91 配制。

2、配制原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L): 室溫溶解原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)(5mg/L),取 10μl 加至990μl  FEP 酸化液,混勻,即為原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L),4℃可保存 1 周。

3、按下表進(jìn)行操作,并以生理鹽水作為空白對(duì)照

                           空白管     標(biāo)準(zhǔn)管   待測(cè)管

肝素抗凝全                                                            0.05

原卟啉Ⅸ標(biāo)準(zhǔn)工作液(50μg/L)                   0.05       

生理鹽水                                                 0.05                 

FEP 酸化液(ml)                                 3.5          3.5     3.5

4、置于漩渦振蕩器上振蕩 23min,3000 r/min 離心 6min,取上清。

5、熒光分光度計(jì)進(jìn)行熒光度測(cè)定(激發(fā)濾片 400nm,發(fā)射濾片 600nm),以空白管作為調(diào)零點(diǎn),標(biāo)準(zhǔn)管校熒光強(qiáng)度并調(diào)至 100,讀取待測(cè)管的熒光強(qiáng)度讀數(shù)(Fu )。

6、另用該肝素抗凝全血測(cè)紅細(xì)胞比容(PCV ),紅細(xì)胞比容常采用臨床檢驗(yàn)科的血細(xì)胞自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。

結(jié)果計(jì)算:FEP(μg/L,RBC)=35×(Fu/PCV )

參考區(qū)間: 正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC

注意事項(xiàng):

1、 整個(gè)操作均應(yīng)在避光條件下進(jìn)行,并盡快完成。

2、 原卟啉在強(qiáng)光下易分解,收集好的血液樣本應(yīng)立即 4℃避光保存,24h 以?xún)?nèi)用完。

3、 熒光強(qiáng)度會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸衰退,但 2h 以?xún)?nèi)基本穩(wěn)定。

4 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6 個(gè)月有效。