Elisa試劑盒具有、靈敏、特異的抗體,穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,已包被抗原或抗體的固相載體,陰性對照品和陽性對照品,參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清,結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,
Elisa試劑盒常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會發(fā)生酶-底物反應(yīng)。
37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,Elisa試劑盒不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長,在ELISA中一般不予采用,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體,Elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn),值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。